猪腹膜基质膜的制备及表征:一种新型生物材料的制备方法
新鲜宰杀的成年猪的腹膜组织被采集,并在-20°C下冷冻保存,直至使用。采集的样本从相邻的腹膜前脂肪中解剖出来,然后切成小块,并在4°C的蒸馏水中浸泡一夜。然后,这些样本被液氮冷冻5分钟,再在室温下的蒸馏水中解冻20分钟,形成一个冷冻-解冻循环。处理过的组织经过0、3和7个循环处理(分别命名为对照组、F/T 3和F/T 7)。
完全冷冻-解冻处理后,获取的样本被置于4°C的2 g/L氢氧化钠溶液中孵育12小时,并转移到50%、70%、75%、80%、95%、100%梯度乙醇、丙酮和叔丁醇中脱水。处理后的产物用正己烷脱脂20小时,然后用0.5%盐酸酸化5小时。在4°C下,经过20 g/L氯化钠溶液高渗处理5小时后,将dECM膜用10 g/L碳酸氢钠溶液处理以调节pH至中性。在每个步骤之间,dECM膜都要用蒸馏水彻底冲洗。
最后,dECM膜被冻干并用25 kGy的γ射线灭菌。dECM的宏观图像由相机(佳能,日本)记录。
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