WRKY21蛋白与PHT1;1启动子片段的结合研究：电泳迁移率试验(EMSA)和染色质免疫沉淀(ChIP)-qPCR分析

这段文字描述了一项实验，使用电泳迁移率试验(EMSA)来检测WRKY21与PHT1;1启动子片段的结合。实验中，使用生物素标记的探针与MBP-WRKY21蛋白进行孵育。为了竞争标记的F2 DNA探针，添加了过量的未标记的探针(冷探针)。同时还设置了阴性对照组，其中生物素标记探针单独孵育或与MBP蛋白孵育。在实验结果中，WRKY21-DNA复合物(结合探针)和游离DNA探针分别用黑色箭头表示。此外，还进行了染色质免疫沉淀(ChIP)-qPCR分析，用于检测WRKY21与PHT1;1启动子区的结合。实验中使用了Pro35S:GFP和Pro35S:WRKY21-GFP转基因水稻种子进行实验，取整株进行ChIP分析。通过RT-qPCR对PHT1;1启动子中富集的DNA片段(F1和F2)进行定量。富集计算为免疫沉淀与输入的比值。实验数据显示，与对照组相比，WRKY21-GFP组与Pro35S:GFP组存在显著差异。通过使用Student 's t检验确定了p值，并表示差异显著性水平为p < 0.01。