RNA提取常见问题及解决方案：污染、A260/A280比值、得率和降解

RNA酶是RNA提取过程中常见的污染物，主要污染来源包括：实验室工作表面、空气、试剂、仪器和人员等。

防止RNA酶污染的措施包括：

• 使用RNase-free试剂和仪器；
• 穿戴手套；
• 使用RNase Inhibitor。

提取RNA样品的A260/A280比值若小于1.65，可能的原因包括：

• 污染；
• 蛋白质和有机物的残留；
• RNA降解。

提高A260/A280比值的措施包括：

• 纯化RNA样品；
• 去除DNA和蛋白质。

若RNA得率较低，最可能出现的原因包括：

• 样品量不足；
• RNA降解；
• 污染。

TRIzol试剂主要成分是：酚和胍。酚用于破坏细胞膜和核膜，释放RNA、DNA和蛋白质，胍用于中和DNA和RNA的负电荷，使其沉淀。

导致所提取RNA降解的原因包括：

• 酶的污染；
• 样品存储不当；
• pH值不正确。

DEPC通过与水中的羟基结合形成稳定的复合物，抑制RNA酶的活性。