志贺氏菌、大肠杆菌和产气肠杆菌的差异培养基鉴定法

差异培养基鉴定法鉴别志贺氏菌、大肠杆菌和产气肠杆菌

实验原理： 差异培养基鉴定法是利用细菌在不同培养基上的生长特征、代谢产物等差异进行鉴定的方法。本实验选取三种常见的肠道细菌，即志贺氏菌、大肠杆菌和产气肠杆菌，通过不同培养基上的生长特征、代谢产物等差异进行鉴定。

实验步骤：

1. 志贺氏菌鉴定

• 用具：亚硝酸钠试剂、亚硝酸还原酶试剂、硫氰酸铁铵试剂、TTC试剂

• 步骤：

  1. 取一块 MacConkey 培养基平板，用棉球沾取志贺氏菌悬液涂抹于平板上。
  2. 在涂抹的志贺氏菌区域上滴加亚硝酸钠试剂和亚硝酸还原酶试剂，静置 1min。
  3. 再滴加硫氰酸铁铵试剂，观察是否出现红色沉淀。
  4. 若出现红色沉淀，则为志贺氏菌，若未出现红色沉淀，则可能为大肠杆菌或产气肠杆菌。
  5. 在未出现红色沉淀的区域上滴加 TTC 试剂，若出现红色，则为产气肠杆菌，若未出现红色，则为大肠杆菌。

2. 大肠杆菌鉴定

• 用具：甜菜红试剂、氨水试剂

• 步骤：

  1. 取一块 EMB 培养基平板，用棉球沾取大肠杆菌悬液涂抹于平板上。
  2. 观察菌落形态，若为黑色带绿色光泽的菌落，则为大肠杆菌。
  3. 若菌落为粉色，则可能为产气肠杆菌或其他细菌。
  4. 在粉色菌落上滴加甜菜红试剂，若菌落变为红色，则为产气肠杆菌，若未变色，则为其他细菌。
  5. 在未变色的菌落上滴加氨水试剂，若菌落变为淡黄色，则为产气肠杆菌，若未变色，则为其他细菌。

3. 产气肠杆菌鉴定

• 用具：气泡管

• 步骤：

  1. 取一块 Triple Sugar Iron 培养基斜面，用棉球沾取产气肠杆菌悬液涂抹于斜面上。
  2. 观察菌落形态，若为黑色带绿色光泽的菌落，则为大肠杆菌。
  3. 在培养基上观察气泡产生情况，若产生气泡，则为产气肠杆菌，若未产生气泡，则为其他细菌。

实验结果： 通过以上实验步骤，可以鉴定出志贺氏菌、大肠杆菌和产气肠杆菌。