AAV 基因组完整性分析：标准与加速样品制备方法的比较

结论

本文对用于评估 AAV 基因组完整性的标准和加速样品制备方法进行了比较，旨在评估其大小、质量以及潜在杂质的比例。标准的 2.5 小时工作流程提供了更深入的分析，包括使用苯酶处理去除衣壳外的任何核酸杂质，从而简化了数据解读。另一方面，加速工作流程（跳过苯酶和蛋白酶 K 消化步骤，但仍保留硫酸胍介导的纯化步骤）的基因组完整性分析仅需 30 分钟，包括 CGE-LIF 分离，但无法区分衣壳内外核酸杂质。加速工作流程应用于分析不同基因组负载大小的多种 AAV 血清型。结果表明，加速方法适合于 AAV 生产过程中的快速质量检测，但对于深入的杂质分析，建议使用标准技术。值得注意的是，本文介绍的分析方法在进一步微调后可能具有滴度测定的潜力。