加速方案的应用

将加速样品制备方案应用于以下三种具有不同血清型的样品:AAV2(基因组大小为4.69 kb)、AAV8(基因组大小为2.8 kb)和AAV5(基因组大小为2.35 kb)。所得的电泳图谱在图3中进行了比较。

AAV2样品(示踪图a)显示出较为干净,有几个小峰(峰组1)代表较小尺寸的杂质(0.5-0.9 kb),峰2代表基因组DNA。峰3可能是相同的完整基因组,但具有不同的二级结构,通过毛细管凝胶电泳的高分辨率得以分离。

中间的示踪图(b)显示了AAV8-2.8 kb样品释放的DNA的CGE-LIF分析结果。在这里,宽峰1代表大约0.2至1.2 kb范围内的所有小尺寸和大尺寸杂质的聚集,而峰2代表2.8 kb完整的DNA。与示踪图a类似,峰3可能是带有完整基因组的不同二级结构。

底部的示踪图(c)显示了AAV5-2.35 kb样品的电泳图谱。与其他示踪图类似,这里也检测到较小尺寸的杂质,分辨率更好,尺寸范围略窄,大约为0.5-0.8 kb。这些轻微的差异可能是由实际的制造过程引起的。

加速样品制备方案应用于不同血清型腺相关病毒的分析

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