组织切片免疫组化染色步骤优化

组织切片免疫组化染色步骤优化

为提高实验结果的准确性和可重复性，对组织切片免疫组化染色步骤进行了如下优化：

1. PBS清洗: 将组织切片置于磷酸盐缓冲液 (PBS) 中清洗三次，每次持续5分钟。所有后续洗涤步骤均采用此标准化操作流程。

2. 丙酮固定: 室温放置30分钟后，将切片转移至丙酮中固定10分钟。

3. PBS清洗: 重复步骤1的PBS清洗操作。

4. 过氧化氢孵育: 将切片置于3%过氧化氢溶液中孵育10分钟。

5. 封闭: 清洗后，使用封闭液将切片于室温封闭1小时。

6. 一抗孵育: 将切片转移至以封闭液配制的一抗溶液中，4°C孵育过夜。

7. 二抗孵育: 清洗后，将切片转移至预先配制的二抗溶液中，室温孵育30分钟。

8. ABC试剂孵育: 清洗后，将切片转移至新鲜配制的ABC试剂中，室温孵育30分钟。

9. DAB显色: 清洗后，将切片转移至DAB试剂中进行显色反应，随后进行脱水处理并封片。

通过标准化洗涤步骤、优化孵育时间和温度以及使用新鲜配制的试剂，该实验方案旨在最大程度地减少实验误差并提高结果的可靠性。