冷冻电镜样品制备流程:步骤详解及注意事项
使用冷冻电镜时,样品制备流程通常包括以下步骤:
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选择合适的样品:冷冻电镜适用于观察生物样品中的超微结构,如蛋白质、细胞、细胞器等。样品应该是新鲜的,并且需要在室温下处理。
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制备样品:样品制备需要在低温下进行,最好使用冷冻工作站。常见的制备方法包括:冷冻断面、冷冻凝胶、冷冻浸渍等。
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冷冻固化:将样品置于氮冷冻剂中,使其迅速冷却并固化。这个过程需要快速进行,以避免样品的结构变化。
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制备薄片:使用超薄切片机或冷冻切片机,将样品切成薄片。这些薄片需要在低温下处理,以保持结构的完整性。
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放置在电镜中:将制备好的样品薄片放置在冷冻电镜中,进行成像。在成像的过程中,需要保持样品的温度低于零下180℃。
注意:样品制备时需要注意避免样品中的水分过多,以免影响成像效果。同时,还需要注意避免样品受到过度处理,以保持其结构完整性。
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