高灵敏THC检测:基于金属纳米酶的CL免疫分析新方法
本实验开发了一种基于金属纳米酶的CL免疫分析新方法,用于THC的高灵敏特异性检测。通过在氨基改性玻璃片表面手动贴膜,形成包含48个传感位点的高通量阵列。海胆状金纳米粒子 (AuNPs) 通过酰胺缩合反应固定在氨基片上,用于富集四氢大麻酚-牛血清白蛋白 (THC-BSA)。THC-BSA 通过共价作用固定在氨基片的AuNPs表面,形成用于检测THC的免疫传感器。在有机金属框架 (MOF) 表面通过酰胺键缩合于抗抗体IgG形成的功能化发光探针IgG-MOF,可催化鲁米诺-过氧化氢底物,产生化学发光。标准品/待测样品中存在THC时,将与基底上的THC-BSA竞争THC抗体及其抗抗体IgG,导致结合在基底上的IgG-MOF少,冲洗后,加入底物,化学发光较弱。使用CCD相机同时采集所有传感位点的化学发光信号,据此建立THC的CL分析方法。
相比天然蛋白酶,2D MOF更稳定且成本更低,具有独特的理化特性且检测时具有高灵敏的特点。AuNPs的使用可提高THC-BSA包被量,有利于提升方法灵敏度。优化反应条件后,考察该方法的线性范围、检测限、检测通量等参数。用于实际样品的检测时,比较本方法与高效液相串联质谱的测定结果,考察方法的可靠性与应用潜力。
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