B 细胞门控策略：详细指南

为了筛选 B 细胞，可以使用以下门控策略：

排除粘连体和死细胞: 使用 FSC-H 和 FSC-A 排除粘连体，并使用 Ghost Dye 染色排除死细胞和碎片。
单核细胞门控: 根据 FSC-A 和 SSC-H 设门，包括单核细胞，但不包括大多数粒细胞。
排除髓系细胞: 从单核细胞中进一步排除 CD66b+ 髓系细胞（粒细胞）。
B 细胞门控：
- 使用 CD19 阳性表达和 SSC-H 门控筛选 B 细胞。
- 使用 CD22/CD24 组合的二级门控检查任何潜在的 CD19-B 细胞。
无 CD19 门控的 B 细胞识别:
- 通过显示 CD10 与 CD66b 在单核细胞下排除 CD66b+ 细胞。
- 使用 CD22 和/或 CD24 阳性细胞作为 B 细胞进行分析。
处理与 CD22 结合的非 B 细胞:
- CD22 克隆也与嗜碱性粒细胞和树突状细胞结合。
- 使用 CD45 门来检查任何肿瘤未成熟 B 细胞。
- 嗜碱性粒细胞和树突状细胞具有不同的 CD 标记表达，例如 CD66c/CD123 和 CD73/CD304，可以用来区分。
B 细胞亚群分离:
- 一旦 B 细胞被门控后，可以进一步分离成熟 B 细胞（CD20、CD45 表达明亮）和未成熟 B 细胞（CD45 暗淡，CD20 表达暗淡至阴性）。
优化 CD22 门控:
- 改变 CD22 克隆可以减少与嗜碱性粒细胞和树突状细胞的结合，从而提高 B 细胞分析的准确性。