MTT法测定淋巴细胞转化OD值:原理、步骤及注意事项
MTT法可以用于测定淋巴细胞转化的OD值。以下是一些步骤:
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收集需要进行转化的淋巴细胞,如外周血单个核细胞(PBMC)或淋巴结细胞。
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将细胞悬液以适当的浓度加入到96孔板中。
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添加足够的激动剂,如PHA(植物血凝素)或ConA(凝集素A),以刺激淋巴细胞转化。
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在孔中添加MTT试剂,并在37°C的培养箱中培养4小时。
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用DMSO(二甲基亚砜)将孔中形成的紫色晶体溶解,使其变为紫色液体。
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使用酶标仪或分光光度计读取OD值。
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使用PBS(磷酸盐缓冲液)作为空白对照,以减去基础OD值。
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计算转化程度,通常是用OD值比较对照组和实验组的值。
需要注意的是,MTT法只能测量细胞的代谢活性,而不能测量细胞增殖。因此,它可能不能完全反映细胞转化的效率。
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