材料和方法

伦理声明

本研究获得郑州大学附属中心医院伦理委员会的批准和监督,并符合《赫尔辛基宣言》公布的指南。在收集样本之前,所有参与者都签署了知情同意书。动物实验方案也获得了郑州大学附属中心医院动物保健和使用委员会的批准,并遵循美国国家卫生研究院提出的实验室动物护理和使用指南[17]。我们尽最大努力减少实验动物数量和痛苦。

组织样本收集

首先,从在郑州大学附属中心医院接受手术的30名SUI患者(平均年龄为47.6±8.4岁)收集前壁阴道组织;同时,从在同一时期接受其他手术的30名患者(平均年龄为46.6±9.9岁)收集前壁阴道组织作为对照组。两组患者都没有并发结缔组织相关疾病,如子宫内膜异位症、妇科恶性肿瘤、慢性阻塞性肺气肿或类风湿性关节炎,并且在手术前3个月内没有接受性激素治疗。前壁阴道组织标本从宫颈处隔离出来,每个样本分为两部分;一部分组织用10%中性缓冲福尔马林在25℃下固定12-24小时,然后石蜡包埋进行免疫荧光分析;另一部分存储在-80°C下进行逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot分析。此外,还选取了3个对照组(47.3 ± 7.6岁)的前壁阴道组织进行成纤维细胞分离,用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤,切成小块,然后用胶原酶脱离进行细胞培养和后续实验。


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