PCR 原理详解:DNA 扩增技术揭秘
PCR(聚合酶链式反应)是一种体外扩增 DNA 片段的技术,其原理基于 DNA 的复制过程。PCR 可以 在短时间内扩增 DNA 片段,从而使其数量增加数百万倍,从而便于研究和分析。
PCR 的原理分为三个步骤:变性、退火和延伸。
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变性:将目标 DNA 加热到 95℃ 左右,使其两条链分离,形成单链 DNA。
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退火:将温度降低到 50-60℃,加入针对目标 DNA 的特异性引物。引物是一种短的 DNA 片段,可以与目标 DNA 序列的两端互补。引物的加入使得引物与目标 DNA 上的互补序列结合,形成引物-目标 DNA 复合物。
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延伸:在 50-60℃ 下加入 DNA 聚合酶,该酶能够识别引物-目标 DNA 复合物,并在其基础上合成新的 DNA 链。这个过程是从引物的 3' 端向 5' 端进行的,每次延伸只能加入一个核苷酸。这个过程被称为 DNA 扩增,由此产生的新 DNA 链与模板 DNA 链互补,形成双链 DNA。
以上三个步骤组成了 PCR 的一个循环,每个循环可以产生两倍的 DNA 模板。PCR 反应往往需要多次循环,产生的 DNA 数量会成指数级增加,从而使得 PCR 成为一种高效、快速和可靠的 DNA 扩增技术。
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