Sulforaphane 检测方法:ELISA 原理及步骤详解
Sulforaphane 是一种天然存在于十字花科蔬菜中的化合物,具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种生物活性。ELISA(酶联免疫吸附测定)是一种常用的检测方法,可用于检测 Sulforaphane。
以下是一般的 ELISA 检测步骤:
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样品制备:将待测样品加入提取液中,摇匀离心,取上清液备用。
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酶标板涂层:将 Sulforaphane 抗原加入到酶标板中,让其在板上吸附。
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阻断:加入阻断液,防止非特异性结合。
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样品加入:将样品加入到酶标板中,让其与抗原结合。
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洗涤:用洗涤缓冲液洗去未结合的物质。
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抗体加入:加入与 Sulforaphane 结合的抗体。
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洗涤:用洗涤缓冲液洗去未结合的抗体。
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酶标记二抗加入:加入与抗体结合的酶标记二抗。
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洗涤:用洗涤缓冲液洗去未结合的酶标记二抗。
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底物加入:加入底物,使其与酶标记二抗反应。
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反应停止:加入停止液,停止反应。
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测定:用酶标仪测定吸光度值。
通过测量样品中的 Sulforaphane 含量与标准曲线的比较,可以确定样品中的 Sulforaphane 含量。
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