很少有研究对中国或世界其他地区猪群中PEV-9的流行情况进行系统调查。一些学者曾在台湾温泉娱乐区肠道病毒流行率的调查中,在养猪场下游的一个温泉中检测到PEV-9[18]。在猪粪便标本中检测到杯状病毒的基因序列时,常常与PEV-9具有高度同源性。这些发现表明,PEV-9可能是一种常见病毒的病原体,在中国大陆和中国台湾的猪群中普遍存在。本研究的目的是对中国中东部猪中PEV-9的流行情况进行系统调查。

我们的研究结果表明,PEV-9在中国中东部的猪群中普遍存在。通过RT-PCR检测,20周龄以上的猪感染PEV-9的频率比15周龄以下的猪低,这可能是由于猪群的获得性免疫。后续应对PEV-9的血清流行率进行研究,以确定年龄较大的猪是否比年龄较小的猪具有更高的PEV-9血清阳性频率。

虽然一些PEV毒株与临床疾病有关,如脊髓灰质炎脑脊髓炎[10,11]、肠道疾病[13]和肺炎[14],但很少有报告表明PEV-9具有致病性。在本研究中,我们用从中国猪中分离的PEV-9毒株对两周龄SPF仔猪进行实验感染。其中有2头猪表现出后肢弛缓性麻痹,感染6天后,可以在一些组织中检测到病毒RNA,尤其是脑干和脊髓(表2)。这些结果表明PEV-9对猪具有致病性。

在本研究中,我们采用了从高度保守的5'-UTR中选择的PCR引物来检测PEV-9,并且能够检测到PEV-9和PEV-10。然而,在中国的猪群中只检测到了PEV-9。基于313nt 5'-UTR片段的系统发育分析将中国PEV-9毒株分为两大类。

我们还测定了两个代表毒株的完整RdRp基因,以进一步对中国PEV-9毒株进行分类。小核糖核酸病毒RdRp编码在开放阅读框3'-端的3D区域,在病毒生命周期中发挥着重要作用。由于RdRps在正链RNA病毒中是保守的,因此在小核糖核酸病毒分类学研究中对其进行了遗传学分析[9,19,20]。

在对核苷酸和预测的氨基酸-RdRp序列进行系统发育分析的基础上,两个中国的PEV-9毒株形成了一个与PEV-10和PEV-9都相关的新亚群,这与基于313 nt 5'-UTR序列的系统发育分析不一致。后续应确定当前研究中两种代表性病毒株的完整基因组序列,以准确阐明它们与已发表的PEV-9和PEV-10毒株的关系。

本研究的组织学检查结果表明,PEV9可引起大脑和肺部的病理变化。对中国中东部猪PEV-9流行率的系统调查不仅增加了PEV流行病学资料库,还为临床兽医提供了诊断证据。

中国中东部猪群中猪肠道病毒9 (PEV-9) 的流行情况及致病性研究

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