PEV-9毒株对猪的感染性和致病性研究
为了确定在中国猪群中流行的PEV-9毒株是否会感染猪并引发临床疾病,我们使用了一份PEV-9阳性粪便样本进行实验接种。该样本的RT-PCR反应针对其他PEV病毒(包括猪捷申病毒、PEV1-8和PEV-10)、血凝性脑脊髓炎病毒、奥耶斯基氏病病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖和呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、日本脑炎病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、戊型肝炎病毒、猪萨佩罗病毒、巨细胞病毒、猪细环病毒和猪细小病毒均为阴性反应。在接种前,我们通过0.22μm微过滤器(Millex GV,Millipore)对上清液进行纯化,然后使用装有3mL病毒悬浮液的注射器进行口服途径接种12头2周大的SPF级巴马仔猪(SJTU兽医研究所),平均体重为500 g。另外三只巴马仔猪接种PBS作为对照组。每只仔猪饲养在一个单独的笼子内。
在接种后的21天(PI)期间,我们每天观察猪只的临床症状。在第2、4、6、8、14、21天分别处死2头受感染的猪只,并在第2、8、14天分别处死1头对照组仔猪。解剖时,我们采集组织器官进行病毒检测,包括血清、粪便、肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺、胃、淋巴结、大脑、小脑、脑干、脊髓和鼻腔组织,并将样品于−80℃下冷冻保存。本研究方案已经经过上海生物模型生物研究中心动物护理与使用委员会批准,许可证号为SRCBO62043034。在这项研究中,我们遵循了上海生物模型生物研究中心的指导方针。
我们采集了三头发热猪和一只对照猪的肝、脾、肾、心、肺、胃、淋巴结、大脑、小脑、脑干、脊髓和鼻腔进行组织学检查。将组织固定在10%中性缓冲福尔马林中,经过常规处理后,进行了以下操作。
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