焦磷酸测序的第一步是将dATP与5'-AATT的T碱基结合,使DNA得到延长并释放产生2个焦磷酸。第二步是依次加入dCTP和dGTP,产生两个焦磷酸的5'-CG末端片段。第三步是加入dTTP,与5'-AATT的A碱基结合产生两个焦磷酸。第四步是加入dCTP和dGTP,由于没有延伸,不会释放焦磷酸。释放的焦磷酸经过硫酸化酶的作用,产生ATP将荧光素转化为氧化荧光素,光信号由CCD捕获。未被剪切的甲基化的C产生5'-CG末端,在第二步不会产生C + G信号,而非甲基化的位点可以,因此可以将DNA甲基化水平与样本C+G的信号比值相关联。限制性酶切与焦磷酸测序相结合的LUMA测序方法的最大优点是特异性高,变异性低,因此在发现DNA甲基化改变中的微小差异方面具有很大优势。

修改这句话焦磷酸测序第一步首先是加入dATP使其与5-AATT的T碱基结合DNA得到延长即可释放产生2个焦磷酸

原文地址: https://www.cveoy.top/t/topic/ijO8 著作权归作者所有。请勿转载和采集!

免费AI点我,无需注册和登录