修改这句话首先使用甲基化敏感的NotI酶切序列GC↓GGCCGC或AscI GG↓CGCGCC对样本DNA进行消化以识别包含2个CG点的序列。这种序列在基因组中出现的频率并不高但在CpG岛中却很常见。用放射性物质32P对DNA片段末端进行标记然后使用甲基化敏感的酶如EcoRV、PstI或PvuII再次对DNA进行消化以进一步片段化DNA。在凝胶电泳后采用第三个甲基化不敏感性酶HinFI对凝胶中的D
首先,使用甲基化敏感的酶NotI(酶切序列GC↓GGCCGC)或AscI (GG↓CGCGCC)对样本DNA进行酶切,以识别含有2个CG点的序列。这种序列在基因组中出现的频率并不高,但在CpG岛中却很常见。接下来,使用放射性物质(32P)对DNA片段末端进行标记,然后再次使用甲基化敏感的酶(如EcoRV、PstI或PvuII)对DNA进行酶切,以进一步片段化DNA。在凝胶电泳后,使用第三个甲基化不敏感的酶HinFI对凝胶中的DNA进行酶切,并在非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行继续电泳。这次电泳的方向与第一次电泳方向垂直。最后,使用同位素磷扫描仪对样品进行扫描[67]。与对照相比,图谱中确定新增的位置即可能为DNA甲基化位点。该方法可以检测整个基因组中超过90%含有CpG岛的DNA片段,并对数以千计的CpG岛片段进行分析。
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