人类胎盘通过LifeNet Health的器官和组织采集服务从9个具有研究授权的捐赠者处获得,并进行冷冻保存。整个绒毛膜板被研磨、用水清洗,然后使用2%的N-月桂基肌氨酸(Sigma Aldrich,密苏里州圣路易斯)进行细胞脱细胞化处理,处理时间为16-24小时。用水进行洗涤,每小时更换一次,直到清晰,然后取一部分样品进行H&E染色的粗略组织学分析以验证细胞去除效果(在弗吉尼亚州诺福克的Bons Secours DePaul医疗中心处理)。然后通过离心(500 X G)收集脱细胞化组织,用0.1M盐酸和胃蛋白酶(Sigma-Aldrich,密苏里州圣路易斯)均质化,消化64-72小时,然后在pH 8.0下不可逆地灭活胃蛋白酶。确认人类胎盘细胞外基质(hpECM)的液体产物在37°C下形成凝胶,而在室温至4°C时仍保持液体状态。通过修饰的Lowry蛋白质测定试剂盒(Pierce,纽约Grand Island)按照制造商的建议测定了hpECM中的总蛋白质浓度。最终确认hpECM制剂不含有支原体(MycoAlertTM Plus,Lonza),内毒素含量<0.5 EU/ml。

请用地道、专业、科学、书面化的中文翻译如下内容:Human placentas were procured from 9 donors with research authorization through LifeNet Health’s organ and tissue procurement service and stored frozen Whole chorionic plate wa

原文地址: https://www.cveoy.top/t/topic/iGZR 著作权归作者所有。请勿转载和采集!

免费AI点我,无需注册和登录