设计实验将志贺氏细菌、大肠杆菌和产气肠杆菌分别鉴别出来并说明实验原理。

实验名称：差异培养基鉴定法

实验原理：差异培养基鉴定法是利用差异营养需求和代谢产物的不同，在不同的培养基上进行分离、鉴定不同的细菌。本实验选择常见的三种肠道细菌进行鉴定，分别是志贺氏菌、大肠杆菌和产气肠杆菌。

实验步骤：

1. 志贺氏菌鉴定

用具：亚硝酸钠试剂、亚硝酸还原酶试剂、硫氰酸铁铵试剂、TTC试剂

步骤：

（1）取一块 MacConkey 培养基平板，用棉球沾取志贺氏菌悬液涂抹于平板上。

（2）在涂抹的志贺氏菌区域上滴加亚硝酸钠试剂和亚硝酸还原酶试剂，静置 1min。

（3）再滴加硫氰酸铁铵试剂，观察是否出现红色沉淀。

（4）若出现红色沉淀，则为志贺氏菌，若未出现红色沉淀，则可能为大肠杆菌或产气肠杆菌。

（5）在未出现红色沉淀的区域上滴加 TTC 试剂，若出现红色，则为产气肠杆菌，若未出现红色，则为大肠杆菌。

2. 大肠杆菌鉴定

用具：甜菜红试剂、氨水试剂

步骤：

（1）取一块 EMB 培养基平板，用棉球沾取大肠杆菌悬液涂抹于平板上。

（2）观察菌落形态，若为黑色带绿色光泽的菌落，则为大肠杆菌。

（3）若菌落为粉色，则可能为产气肠杆菌或其他细菌。

（4）在粉色菌落上滴加甜菜红试剂，若菌落变为红色，则为产气肠杆菌，若未变色，则为其他细菌。

（5）在未变色的菌落上滴加氨水试剂，若菌落变为淡黄色，则为产气肠杆菌，若未变色，则为其他细菌。

3. 产气肠杆菌鉴定

用具：气泡管

步骤：

（1）取一块 Triple Sugar Iron 培养基斜面，用棉球沾取产气肠杆菌悬液涂抹于斜面上。

（2）观察菌落形态，若为黑色带绿色光泽的菌落，则为大肠杆菌。

（3）在培养基上观察气泡产生情况，若产生气泡，则为产气肠杆菌，若未产生气泡，则为其他细菌。

实验结果：通过以上实验步骤，可以鉴定出志贺氏菌、大肠杆菌和产气肠杆菌