子宫内膜异位症影响卵泡发育和排卵的机制研究

与子宫内膜异位症相关的不孕症机制一直是激烈研究的对象。最近，我们的研究小组发现，在进行辅助生殖技术周期的卵巢刺激过程中，患有子宫内膜异位症的妇女提取的卵子数量减少，尽管刺激时间更长，使用的促性腺激素剂量更高。与此观察一致的是，患者中还观察到了更高的意外的卵巢刺激反应不良率[16]。另一方面，目前尚未确定与子宫内膜异位症相关因素如何对局部卵泡内环境产生负面影响 19。

在这种情况下，我们先前的研究报道，患有子宫内膜异位症的黄体化颗粒细胞中CYP19A1基因表达较不患病的妇女在辅助生殖技术程序中有所减少，尽管结果并不一致[13, 26, 27]。据我们所知，本研究包括患病和不患病的辅助生殖技术患者中最多的黄体化颗粒细胞样本，旨在阐明这个问题。这里呈现的结果证实了患者在进行辅助生殖技术周期的控制性卵巢刺激后提取的卵子数量减少。另一方面，我们在患病和不患病的妇女的黄体化颗粒细胞中CYP19A1转录本以及其上游调节因子StAR和3βHSD的水平方面没有发现差异。这种差异在壁层和积瓦颗粒细胞中也持续存在。我们也没有发现子宫内膜异位症和对照组之间卵泡雌二醇浓度、hCG诱导时的系统雌二醇水平和每个提取卵子的雌二醇水平方面的显着差异。事实上，导致提取的卵子数量减少的改变似乎更为微妙。正如预期的那样，尽管卵泡和系统雌二醇水平之间存在非常强的相关性，但是CYP19A、STAR和3βHSD在黄体化颗粒细胞中的表达对排卵诱导时的局部雌激素水平的影响大于对系统水平的影响。事实上，雌二醇的循环水平由各种器官产生，并且可以受遗传和环境因素的影响[28]。然而，与对照组观察到的情况相反，在子宫内膜异位症患者中，这三个基因（CYP19A、STAR和3βHSD）的黄体化颗粒细胞表达甚至与卵泡雌二醇水平无关。这表明了控制卵泡成熟过程的核心调节网络的改变。

CYP19A的作用、黄体化颗粒细胞扩张和雌二醇产量之间的关系比最初认为的更复杂。通过增加黄体化颗粒细胞层的厚度来提高雌二醇产量的空间是有限的，因为随着黄体化颗粒细胞层的厚度增加，不足的促性腺激素和雄激素前体物质无法到达黄体层内部，从而限制芳香酶的活性[29]。卵泡需要变得更大，以容纳更多具有相似厚度的黄体化颗粒。因此，在卵泡发育后期，产生雌激素的黄体化颗粒细胞层厚度的可变性对于获取卵泡优势和萎缩以及卵泡大小的平衡至关重要。基于此，子宫内膜异位症患者中CYP19A表达与卵泡雌二醇水平之间的缺乏关联可能与已知的氧化应激诱导的黄体化颗粒细胞凋亡增加有关[30, 31]。已经证明，患有子宫内膜子宫的人类黄体化黄体细胞表达与与蛋白质反应相关的mRNA水平高度相关。此外，与子宫内膜子宫患者的黄体化颗粒细胞相比，磷酸化的内质网（ER）应激传感器蛋白inositol-requiring enzyme 1和double-stranded RNA-activated protein kinase-like ER kinase的水平升高。鉴于ER应激导致ER应激传感器蛋白的磷酸化并诱导UPR因子，这些发现表明这些细胞正处于介导细胞凋亡的ER应激状态[30]。在卵泡环境的微妙平衡中，黄体化颗粒细胞扩张的减少可能不会对芳香酶活性造成严重限制和卵泡雌二醇产量的显着减少。卵泡的大小可能更受影响。这与在患有子宫内膜子宫的性腺中，与同一患者的对侧完整卵巢相比，发育出较少的共同性卵泡的观察结果一致[32]。事实上，由于细胞凋亡的增加，卵泡不需要变得更大，以容纳具有相似厚度的更多黄体化颗粒细胞。另一方面，健康的黄体化颗粒细胞与卵子健康相关[33, 34]。作为直接接触配子的紧邻的积瓦细胞，在诱导减数分裂和提供代谢支持方面至关重要，黄体化颗粒细胞凋亡的增加可能对卵子发育产生负面影响[35]。因此，不足为奇的是，尽管我们在这里观察到了黄体化颗粒细胞中CYP19A1表达与控制组中卵子提取数量之间的正相关关系，但这种关联在子宫内膜异位症患者中并未观察到。

该研究有一些局限性。黄体化颗粒细胞和积瓦CYP19A1表达仅在mRNA水平进行了评估，而没有以蛋白质或酶活性的形式进行评估。即使在其他几项研究中也没有评估蛋白质水平，但我们不能排除蛋白质水平存在一些差异[36, 37]。另一个限制是我们不能排除一些对照组妇女中存在盆腔浅表子宫内膜异位症，因为她们没有进行诊断性腹腔镜以排除子宫内膜异位症的存在。然而，这些妇女不应超过10％的病例，并且最终可能会稀释观察到的效果。最后，虽然从分析的辅助生殖技术患者中收集的黄体化颗粒细胞样本数量比其他类似研究要多得多，但仍然有限。另一方面，这个样本量使我们能够进行各种多变量分析，检测出有趣的关联。

总之，过去十年来，子宫内膜异位症对卵泡发育和排卵的影响一直是研究的重点。根据辅助生殖技术的结果，这种疾病对卵巢功能有一些负面影响[13]。然而，这些影响的生物学和分子机制尚不清楚。这里呈现的结果表明，患病妇女的卵泡环境中存在微妙的改变。事实上，CYP19A1转录本的水平与子宫内膜异位症患者的卵泡雌二醇水平和提取的卵子数量无关。需要进一步研究以阐明其临床意义，以及是否有可能和有价值地开发克服这种缺陷的治疗方法。