修改下面这句话 随着CRISPR技术的不断改进一系列基于CRISPR-dCas9的DNA甲基化靶向编辑工具被开发出来。本研究采用Rudolf Jaenisch 实验构建的Fuw-dCas9-Tet1CD-P2A-BFP 对ARAP1-S的启动子区进行靶向去甲基化。如图 3 - 41 所示以pLKO5sgRNAEFStRFP657作为sgRNA骨架载体首先通过网站设计3条靶向针对ARAP1-S
随着CRISPR技术的不断改进,我们开发了一系列基于CRISPR-dCas9的DNA甲基化靶向编辑工具。本研究使用了Rudolf Jaenisch实验室构建的Fuw-dCas9-Tet1CD-P2A-BFP来靶向去甲基化ARAP1-S的启动子区。如图3-41所示,我们首先使用pLKO5.sgRNA.EFS.tRFP657作为sgRNA骨架载体,设计了3条靶向ARAP1-S的sgRNA序列,并构建了相应的sgRNA质粒。然后,我们通过慢病毒逐步感染了Fuw-dCas9-Tet1CD系统和sgRNA系统,最后提取细胞的DNA和RNA进行甲基化水平和表达量的检测。
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