犬细小病毒和猫瘟热病毒基因组克隆与抗原表位分析

犬细小病毒（CPV）和猫瘟热病毒（FPV）基因组图谱单位（m.u.）0到98.8之间的DNA序列被克隆到质粒载体中，形成具有传染性的分子克隆体。这些质粒被转染到感受性细胞中，恢复的病毒被证明包含完整的基因组，重新生成了完整的病毒5'末端，达到100 m.u.从质粒中衍生的病毒与原始病毒进行比较，显示在抗原类型、血凝抗原（HA）类型和宿主范围上无法区分。通过制备CPV和FPV之间的重组克隆体，并通过限制性酶切图谱和测序重组位点附近的病毒DNA，证明了病毒的质粒起源。

我们的野生型分离物CPV-d和FPV-b的序列已经完成，揭示了50个核苷酸序列差异，其中16个确定了编码变化，包括NS-1中的5个，NS-2中的2个和VP-2蛋白中的9个。还确定了这两种病毒5'末端（95.3-100 m.u.）的序列。重组病毒的分析确定了CPV和FPV特异性抗原表位，血凝抗原的pH依赖性以及影响病毒在VP-1和VP-2结构蛋白基因中的犬宿主范围的序列。

大多数特定的变化被证明要么在病毒外壳的表面上，要么在一个氨基酸内，表明细小病毒外壳的暴露表面在确定多个病毒功能中起重要作用。特定的表位受到病毒外壳上一个凸起区域（'三倍螺钉'）的差异的影响，而血凝抗原的pH依赖性差异则位于病毒外壳表面的二倍对称轴处的凹陷区域附近。