猫瘟热病毒特异性猫化单克隆抗体的开发:猫免疫球蛋白mRNA序列分析
作为对免疫接种的反应,B细胞产生了一系列特异性抗体。基于抗体的免疫疗法在治疗人类各种疾病方面具有巨大的潜力。然而,在猫中应用基于抗体的免疫疗法受到限制,因为B细胞中编码重链和轻链免疫球蛋白的mRNA缺乏物种特异性的完整序列。为了解决这个障碍,我们从猫外周血单个核细胞(PBMCs)中分离了mRNA,并利用已有的免疫球蛋白序列以及5'和3' RACE克隆和测序了重链和轻链免疫球蛋白mRNA。我们从两只猫的PBMCs中恢复了mRNA,克隆和测序了猫IgG1a(IGHG1a)、IgG2(IGHG2)和IgA(IGHA)的重链可变和常量区域,以及轻链(λ和κ)。利用这些序列,我们准备了两个双顺反子载体,用于哺乳动物表达代表性的猫重链(IGHG1a)和轻链(λ或κ)。在这里,我们报道了新颖的猫Ig序列,一种表达特异性抗原的猫化单克隆抗体的技术,以及对猫瘟热病毒的功能性猫化单克隆抗体的初步表征。
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