对该技术流程进行改写语句通顺符合技术流程： 224 真藓原生质体制备 1121℃15 min 高温高压灭菌8 D-甘露醇冷却后使用； 2将崩溃酶溶液 4℃2500 g5 min上清液用 022 μm 滤菌膜过滤除菌到新灭菌的50 mL 离心管中； 3用镊子夹取继代 7 d 的原丝体材料放入无菌的崩溃酶溶液中； 4室温放置在摇床摇晃含有原丝体材料的崩溃酶溶液 30 min动作轻柔时间最长为1 h；

2.2.4 真藓原生质体制备

(1) 使用121℃高温高压灭菌8% D-甘露醇，冷却后备用。

(2) 将崩溃酶溶液加入4℃的原丝体材料中，2500 g离心5 min，上清液通过0.22 μm滤菌膜过滤到新灭菌的50 mL离心管中，以除去杂菌。

(3) 使用镊子夹取继代7天的原丝体材料，放入无菌的崩溃酶溶液中。

(4) 将含有原丝体材料的崩溃酶溶液放入室温下的摇床中，轻柔摇晃30 min（最长时间为1 h）。

(5) 使用150目和300目细胞筛过滤材料到小烧杯中。

(6) 将过滤后的溶液转移至新的50 mL圆底离心管中，盖好盖子，14℃下离心200g，使原生质体沉淀。

(7) 使用枪头吸去上清液，加入等体积的8% D-甘露醇溶液，轻轻混匀，再次离心200g，以去除杂质。

(8) 重复上一步骤。

(9) 使用显微镜和血球计数器计数计算需要加入MMM的体积，并检测原生质体的活性。