利用间接免疫荧光实验鉴定引起细胞病变的脑组织液结果显示EV-G 3C蛋白多克隆抗体可特异性识别攻毒的组织液导致的病变细胞表明脑部、肠道组织存在EV-G-PLP感染。EV-G重组率高易发生变异其自然重组不同病毒科PLP基因的现象在各个国家及地区陆续报道。重组易促进病毒进化可能增强病毒对猪群的致病性鉴于此需要对EV-G-PLP进行深入研究。在本实验中考虑到RT-PCR方法具有特异性较强方法简便准确率高

利用间接免疫荧光实验鉴定引起细胞病变的脑组织液，结果显示，EV-G 3C蛋白多克隆抗体可特异性识别攻毒的组织液导致的病变细胞，表明脑部、肠道组织存在EV-G-PLP感染。EV-G重组率高，易发生变异，其自然重组不同病毒科PLP基因的现象在各个国家及地区陆续报道。重组易促进病毒进化，可能增强病毒对猪群的致病性。鉴于此，需要对EV-G-PLP进行深入研究。

在本实验中，考虑到RT-PCR方法具有特异性较强、方法简便、准确率高等优点，因此采用了该方法检测攻毒仔鼠体内的EV-G病毒。由于成年小鼠获得性免疫较完善，攻毒后较难产生病理变化，而1周龄内乳鼠对病毒较易感。综合考虑各方面因素，本实验选择了3日龄的乳鼠进行实验。需要注意的是，病毒在小鼠体内的致病性和复制能力与小鼠品系有关[73]。Gai等[45]采用Balb/c小鼠、昆明小鼠和ICR小鼠进行攻毒实验，确定易感牛肠道病毒HY12的小鼠品系。结果表明，Balb/c小鼠和昆明小鼠并未感染HY12病毒，似乎对HY12病毒具有抵抗力，而ICR乳鼠易感HY12病毒。HY12病毒与EV-G病毒同属小RNA病毒科肠道病毒属的成员，因此选择ICR乳鼠进行EV-G-PLP致病性实验。

EV-G的自然感染途径是粪-口途径，口服感染重复性好，操作简单。因此本实验采用口服途径攻毒。实时荧光定量PCR方法敏感性较好，特异性强，结果准确，可用于定量测定攻毒组织中EV-G-PLP的拷贝数。米雪等[51]研究表明，EV-G的病毒的主要复制部位是仔猪的肠道和脑部，能引发仔猪腹泻，并产生后肢震颤等神经症状。因此，本实验选择攻毒乳鼠的肠道及脑部组织进行qRT-PCR鉴定其病毒载量。结果表明，肠道组织的病毒载量略高于脑部组织，但差异不大。说明EV-G-PLP病毒对宿主的神经系统具有较大隐患，后续实验应持续关注其影响。小RNA病毒中的嗜神经性病毒主要是脊髓灰质炎病毒，其侵入神经系统的路径与肠道病毒相似[74]。因此，EV-G-PLP相关的致病性研究方案可适当参考这类病毒的研究成果。此外，体重变化是机体受到病毒感染的最直观指标之一。此前米雪等[51]使用仔猪作为试验动物进行EV-G病毒致病性实验，实验组较对照组体重变化显著。而本次实验中，EV-G-PLP毒株感染小鼠后其体重变化范围不大，且没有明显的临床症状。

本实验初步探究EV-G-PLP小鼠模型，为后续其他动物模型的建立奠定基础，也为开展EV-G-PLP相关致病机制的研究提供了数据支持