与分子检测相比,流式细胞术(MFC)分析可以进行单个细胞级别的表征,并便于区分死亡和成熟细胞与那些具有更重要的白血病潜力的细胞。这可能提高了特异性,特别是在早期时间点,原始克隆中的受损和/或成熟细胞可能会持续存在。流式细胞术还显示出明显较短的周转时间,具有成本效益,并具有更广泛的适用性。后者可能是真实世界临床设置中最关键的,因为流式细胞术通常不需要评估原始诊断样本。因此,利用敏感的MFC检测非常理想。 MFC的一个挑战是其能力区分白血病细胞和正常成熟的B细胞,特别是在巩固期之后,正常造血回复并增加了正常不成熟的B细胞数量(B. L. Wood,2016)。此外,为了实现10E-5的灵敏度,需要通过MFC分析更多的细胞数。在美国,儿童肿瘤学组(COG)使用一个3管6色面板,下限检测(LLOD)为0.01%。 2017年,EuroFlow开发了一个2管8色面板,证明通过纳入新的标记并增加采集时的细胞数,MFC可以达到与基于PCR的检测方法相当的灵敏度(Theunissen等,2017)。最近,Tembhare等人(Tembhare等,2020)开发了一种10色检测方法,可以实现类似的灵敏度。然而,这些检测以CD19作为唯一的筛选标记,这在针对CD19的单克隆抗体或细胞治疗之后可能会出现问题。最近的研究表明,同时使用CD22和CD24并使用CD66b排除粒细胞可以增强检测CD19阴性疾病的能力(Cherian等,2018)。我们在EuroFlow和华盛顿大学(UW)团队的先前工作基础上,开发了一个新的单管14色16参数检测方法,利用新型EuroFlow抗原评估和UW团队的靶向治疗强度,实现了B-ALL MRD检测的10E-5的灵敏度。这种MFC检测具有快速周转时间,可重复性好,并允许下游测试中细胞富集

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