帮我翻译 Establishment of SUI rat modelsFemale Sprague-Dawley rats aged 8 weeks old weighing 280-330 g Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co Ltd Beijing China SYXK Beijing 2017-0033 were ra
建立SUI大鼠模型 选用8周龄、体重280-330 g的雌性Sprague-Dawley大鼠(北京维特动物实验技术有限公司,北京,中国,SYXK(北京)2017-0033),在12小时光/暗循环下,恒温(20℃-26℃)和湿度(40%-60%)的条件下饲养,自由饮水和饲料。根据先前的研究[18]进行SUI大鼠建模。简要地说,适应环境的大鼠经腹腔注射氯胺酮(50 mg/kg)麻醉,前肢被固定,然后仰卧在笼子里。随后,将导管插入大鼠阴道2-3 cm,并用单根3-0手术针固定。然后用5 mL无菌生理盐水充气。导管悬挂在笼子上,不接触表面。导管的末端装有一个重约0.3 kg的水囊。按照上述方法平行于阴道施加牵引力8小时。在受伤1周后测量最大膀胱容量(MBV)和腹部漏点压力(ALPP),以确定SUI模型是否成功建立。检测结束时,所有大鼠均经腹腔注射戊巴比妥钠(800 mg/kg)安乐死,以收集前阴道壁组织进行后续分析。 评估ALPP和MBV 如先前报道[18],用碘伏消毒大鼠的尿道口,并插入涂有石蜡油的硬膜外导管2-3 cm进入膀胱。实验者将手指放在大鼠耻骨联合上缘,以防止导管穿过膀胱壁。排空大鼠的膀胱后,将注射器连接到硬膜外导管上,并使用微型泵(浙江大学医学仪器,浙江杭州,中国)以10 mL/h的速度注入亚甲蓝无菌生理盐水溶液。随后,当蓝色液体从尿道口溢出时,记录MBV。排空大鼠的膀胱后,从导管断开注射器,并将无菌生理盐水注入到MBV的一半。然后,从大鼠鼻孔中剪下一根胡须以刺激打喷嚏。尿道口流出的蓝色液体被视为打喷嚏试验的阳性结果。每只SUI大鼠都被麻醉并仰卧在位,进行中线切口。在暴露膀胱后,在膀胱顶部制作直径为1.5 mm的孔。将硬膜外导管(0.5-1 cm)植入膀胱。随后,导管被缝合并用5-0缝线固定。亚甲蓝生理盐水(37℃)通过微型泵注入膀胱。最后,借助压力传感器测量膀胱内的压力。 成纤维细胞培养 在对照组中,将前阴道壁组织(0.5×0.5×1.0 cm)用PBS冲洗并切成小块[19]。随后,将组织在25℃下以250 g离心5分钟,然后用胶原酶分离120分钟和DNase I分离20分钟。然后,再次用PBS冲洗细胞,然后在含20%牛血清(HyClone)的Dulbecco修饰的Eagle培养基/高葡萄糖(HyClone;GE Healthcare Life Sciences,Logan,UT,USA)中培养。经过3-5天的初级培养后,用胰蛋白酶分离成纤维细胞2分钟,并在培养瓶中传代
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