猪胰岛移植治疗1型糖尿病的微生物安全性评估

使用猪胰岛代替在糖尿病发病过程中被破坏的胰岛β细胞来治疗1型糖尿病，将面临明显的挑战。其中一个挑战是对胰岛的微生物安全性进行全面评估。在这项研究中，我们描述了一个强大的猪胰岛筛查程序，可以对适用于临床试验的猪胰岛的微生物安全性提供高度的信心。

方法： 一个四个检查点的程序对供体群（大白猪-约克夏×长白杂交动物），单个哨兵动物和胰岛供体动物进行系统筛查，关键是对胰岛微球自身进行筛查。分子学检测方法可对30多种已知病毒进行筛查，而电子显微镜和体外研究则用于筛查潜在的新型或不同的（新出现的）病毒。

结果： 在为期2年的随机动物每月采集的1207个样本中，仅观察到1个可传播性胃肠炎病毒的阳性结果，表明源头群体保持了高水平的生物安全性。鉴于缺乏临床症状，对猪生殖与呼吸道综合征病毒、猪细小病毒和甲型流感病毒的阳性抗体效价证实了群体疫苗接种计划的功效。预期的是，猪呼吸道冠状病毒在群体中存在，因为这是家猪的正常情况。在同一2年期间，从6个哨兵动物和11个供体动物的组织匀浆样本中，通过与4个物种的6种不同细胞系共培养的方式，未检测出病毒的存在。在同一2年期间，使用经验证的分子（32种病毒）、体外培养（来自4个物种的细胞）和透射电子显微镜检测方法（每个供体动物200个细胞轮廓）验证了从12个胰岛供体动物制备的隔离胰岛微球制剂中不存在任何附带病毒。这些经过包埋并具有功能的猪胰岛植入非免疫抑制的糖尿病恒河猴体内长达4年后，没有证据表明病毒传播。在所有六个受体动物的各个时间点，外周血单个核细胞的PCR分析结果均为阴性，对于PCV（2型）、PLHV、PRRSV、PCMV以及PERV-A、PERV-B和PERV-C。

结论： 这个四个检查点的程序是一种强大可靠的方法，用于评估用于临床试验的包埋猪胰岛的微生物安全性。