AAV8-4.5 kb 样品基因组完整性分析：两种样品制备方案的比较

通过遵循图 1 中所描述的两种样品制备方案，利用毛细管电泳激光诱导荧光 (CGE-LIF) 技术对 AAV8-4.5 kb 样品进行基因组完整性分析。方案分别为 (a) 传统工作流程和 (b) 加速工作流程。分析结果显示，峰 1-2 代表较小尺寸杂质（0.5-0.9 kb），峰 3 代表较大尺寸杂质（0.9-1.3 kb），峰 4 代表完整基因组（4.5 kb），峰 5 和峰 6 可能代表完整基因组的二级结构形式。实验条件如下：有效长度 20 cm（总长度 30 cm）、直径 50 μm 的裸融合二氧化硅毛细管，分离凝胶缓冲液：1% PVP（1.3 MDa）、89 mM 三氯甲烷-硼酸（pH 8.3）、2 mM EDTA、4 M 尿素，含有 SYBR Green II（1:25,000 稀释）。注射条件：5 kV，持续 10 秒。施加电场强度：25°C 下的 200 V/cm。