ChIP-seq 数据分析流程:从 SRA 下载到峰注释
- 使用 GEO 推荐的 sratools 工具包中的 prefetch 下载 GSE208043 数据集中的 sra 数据;
- 利用 sratools 工具包中的 fastq-dump 将 sra 格式文件转换为 fastq 格式;
- 使用 fastqc 查看测序文件的质量;
- 使用 trim_galore 去除测序文件中的低质量短序列和接头;
- 利用 bowtie2 将 fastq 文件与下载的 Gencode 参考基因组进行比对;
- 使用 samtools view 将比对好的 sam 文件转换为 bam 文件;
- 利用 samtools sort 对比对好的 bam 文件进行排序;
- 使用 sambamba 去除 bam 文件中的 PCR 重复序列;
- 利用 macs2 callpeak 检索 bam 文件中的峰;
- 利用 macs2 bdgcmp 将 macs2 callpeak 结果中的 bdg 文件转换为 bw 文件;
- 利用 IGV 查看 bw 文件中的峰;
- 运行 R 包 ChIPseeker 对 macs2 callpeak 的结果文件进行注释。
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