Reviewer #1: 在这项研究中,作者旨在证明SLC7A11在细胞内摄取半胱氨酸的作用以及G6PD介导的PPP在产生还原型谷胱甘肽(GSH)和抗氧化应激潜力在间质细胞去膜化过程中的作用。虽然这个主题很有趣,但研究范围过于广泛,不够集中,并且提供的证据远远不足以证明因果关系,支持结论。这里的假设确实包括两个相互独立的路径,它们互不影响,但对于产生GSH来说都至关重要,即SLC7A11介导的半胱氨酸摄取和G6PD/PPP介导的NADPH产生。在这个术语中,最好将这篇文章分成两篇。具体来说,我的担忧如下:

  1. 摘要应重新撰写。摘要应以两到三句介绍研究背景开头,然后跟着要解决的问题、结果和结论。在这篇文章中,不清楚哪些是已知的背景,哪些是新发现。此外,作者指出PPP对间质细胞去膜化至关重要以及其作用机制(事实上,可以从摘要中删除,因为摘要应该简洁),而结论是他们阐明了SLC7A11介导的GSH合成在间质细胞中的关键作用,而没有明确说明关系。这很令人困惑,因为SLC7A11是一种半胱氨酸-谷氨酸转运蛋白,介导细胞内谷氨酸和细胞外半胱氨酸的交换,作者并没有清楚地描述SLC7A11介导的半胱氨酸摄取、PPP产生的NADPH和GSH合成之间的关系。此外,虽然作者陈述了这项研究的目的,但未清楚说明要解决的问题。

  2. 需要进行彻底的英文编辑,因为其中一些逻辑混乱,文章可以更简明。此外,还有一些错误,比如句子结尾和“PPP”之间缺少空格(第103行),还有一些措辞需要改进。此外,作者应对缩写注意一下。对于缩写词,首次出现时应提及全名,然后后续可以使用缩写词。作者已经提到了“GSH”是“还原型谷胱甘肽”的缩写形式(第70行);然而,他们又在第116行中再次使用了“还原型谷胱甘肽”这个术语。应避免这种情况。其他缩写词,如RT-qPCR(第195行,应为定量实时聚合酶链式反应(qRT-PCR)),GPX,GSSG等,它们的全名也应在出现时提到(第195行和第240行)。请检查整篇文章是否存在类似的问题。

  3. 没有道德声明。作者在“研究批准”中提到了一些相关内容,然而,这些不符合标准格式,提供的信息远远不足。动物研究和临床样本的伦理声明应分开。对于动物研究,应说明动物的来源、进行动物实验的设施、动物实验是否获得动物实验伦理委员会的批准(通常是动物实验设施的伦理委员会)、动物实验是否遵循动物实验委员会批准的方案。对于临床样本,应说明样本的来源、样本的标准、患者知情的书面同意、研究是否获得收集样本所在机构的伦理委员会的批准,以及研究是否符合《赫尔辛基宣言》的规定。

  4. 第150-153行等处,应将short interfering RNA缩写为“siRNA”,而不是“SiRNA”。

  5. IHC使用的抗体是什么?作者没有说明他们进行了哪种染色。

  6. 图1A中,作者提到这些是相对的SLC7A11 mRNA水平。使用了什么对照?如果他们将DE组的SLC7A11水平与NC组进行了比较(这里,DE和NC的全名也应在每个对应的图例中说明),那为什么NC组的水平不是1?此外,SLC7A11的水平与处理时间的长度之间是否有任何时间依赖性?

  7. 图1B-F的顺序令人困惑。根据中心法则,mRNA转录成蛋白质,qRT-PCR的结果应该在蛋白质印迹之前。这也适用于图2B、C,图3A-D等。此外,作者应注意每个子图的位置。在图1D、2D和2E的右侧放置图1C和2C是令人困惑的。

  8. 图2的逻辑非常难以理解,关于氧化应激在去膜化过程中减少ROS并增强GSH抗氧化系统的作用以及氧化应激对去膜化的影响的证据不足。作者应首先展示支持去膜化过程中ROS减少的证据,即DCFH-DA、IGFBP1、谷胱甘肽还原酶、GPX和Bodipy染色。然后作者应展示氧化应激对去膜化标记物mRNA和蛋白质印迹的影响。此外,IGFBP1 mRNA表达水平是否显示过氧化氢剂量依赖性?另外,过氧化氢处理下ROS清除剂是否改善去膜化?

  9. 在整篇文章中,应同时显示IGFBP1和PRL在mRNA和蛋白质水平上的水平。

  10. 为了证明SLC7A11对去膜化至关重要,应进行使用SLC7A11过表达载体和过氧化氢/cAMP+MPA处理的细胞的救援实验。同样,也应进行使用铁死亡抑制剂的实验。

  11. 对铁死亡的特征性描述还远远不够。需要进行线粒体形态学、细胞死亡率(不是通过Annexin V/PI,因为铁死亡与凋亡不同)等的研究(抑制实验、诱导实验和救援实验)。此外,应展示SLC7A11沉默对半胱氨酸摄取的影响。

  12. 图5中,面板的顺序和位置令人困惑。除了蛋白质印迹和mRNA水平的顺序之外,NADPH应该放在NADPH/NAD+比值之前。

  13. "这些发现表明NADP

翻译:Reviewer #1 In this study authors aim to demonstrate the role of SLC7A11 which facilitates the cellular uptake of cystine and G6PD-mediated PPP which provides NADPH in generating reduced glutathion

原文地址: http://www.cveoy.top/t/topic/i0e2 著作权归作者所有。请勿转载和采集!

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