细胞传代步骤详解：从旧培养皿到新培养皿

细胞传代步骤详解：从旧培养皿到新培养皿

细胞传代是细胞培养中一项基本且重要的操作。它允许您将细胞从一个培养皿转移到另一个培养皿，以维持细胞的生长和扩增。以下是进行细胞传代的详细步骤：

1. 吸除旧培养基并润洗

• 从培养箱中取出细胞培养皿，在无菌条件下操作。
• 使用移液器小心吸除培养皿中的旧培养基。
• 加入适量无菌PBS轻轻润洗细胞1-3次，吸除并丢弃润洗液。

2. 胰蛋白酶消化

• 加入适量胰蛋白酶至培养皿中，确保细胞完全浸没。
• 将培养皿放入培养箱中孵育1-5分钟。
• 在显微镜下观察细胞形态，当细胞变圆或开始脱落时，即可终止消化。
• 加入2倍体积的完全培养基终止胰蛋白酶的消化作用。

3. 细胞离心

• 使用移液器轻轻吹打培养皿，使细胞完全脱离培养皿底部并均匀分布在溶液中。
• 将细胞悬液转移至离心管中。
• 将离心管放入离心机，以1000 rpm的速度离心5分钟。

4. 细胞重悬和接种

• 离心完成后，小心吸除上清液，避免触碰沉淀在底部的细胞。
• 加入适量新鲜的完全培养基重悬细胞。
• 根据细胞类型和生长状态，按照1:1.5-1:4的比例将细胞悬液接种到新的培养皿中。
• 将新的培养皿放入培养箱中继续培养。

通过遵循以上步骤，您可以成功地进行细胞传代，并确保您的细胞健康生长。