帮我翻译 Figure 1 Nampt is overexpressed in SUI patients Anterior vaginal wall tissues were extracted from SUI and non-SUI patients a mRNA level of Nampt in tissues was examined by RT-qPCR b Protein leve
图1. Nampt在SUI患者中过度表达。从SUI和非SUI患者中提取前阴道壁组织。(a)使用RT-qPCR检测组织中Nampt的mRNA水平。(b)使用Western blot分析检测组织中Nampt的蛋白水平。(c)使用免疫荧光测定评估组织中Nampt的荧光信号。N = 30。(b和c)中的测量数据以平均值±标准偏差呈现。t检验用于分析(a、b和c)中的数据。**p < 0.01。
图2. Nampt在SUI大鼠模型中过度表达。使用VD处理建立SUI大鼠模型,1周后,通过ALPP(a)和MBV(b)验证模型建立。使用RT-qPCR(c)、Western blot分析(d)和免疫荧光测定(e)检测大鼠前阴道壁组织中的Nampt表达。N = 6。A、B、D和E面板中的测量数据以平均值±标准偏差呈现。t检验用于分析(a、b、c、d和e)面板中的数据。**p < 0.01。
图3. IL-1β处理的成纤维细胞中Nampt表达上调。从非SUI患者的前阴道壁组织中分离和培养成纤维细胞。(a)使用免疫细胞化学方法确定vimentin(左面板)和keratin(Pan-CK;右面板)的表达情况,蓝色代表细胞核,棕色代表阳性的vimentin,即成纤维细胞指标,成纤维细胞经过不同浓度的IL-1β处理。(b)使用CCK-8法评估IL-1β对细胞活力的影响。(c和d)使用RT-qPCR(c)和Western blot分析(d)评估IL-1β对Nampt表达的影响。独立的细胞实验重复3次。测量数据以平均值±标准偏差呈现。单因素方差分析用于分析B、C和D面板中的数据。采用Tukey的多重比较检验进行事后检验。*p <0.05,**p <0.01。
图4. Nampt沉默抑制了IL-1β诱导的SUI成纤维细胞ECM降解。使用IL-1β(10 ng/mL)处理的成纤维细胞分别转染3个片段的LV包装Nampt shRNA,NC shRNA转染作为对照。(a)使用RT-qPCR检测Nampt的mRNA水平。(b)使用Western blot分析检测Nampt的蛋白水平。(c和d)使用RT-qPCR(c)和Western blot分析(d)测试COL1A、ACAN、TIMP-1、MMP-2和MMP-9的水平。(e)使用免疫荧光测定评估COL1A和ACAN的荧光强度。独立的细胞实验重复3次。测量数据以平均值±标准偏差呈现。单因素方差分析用于分析(a和b)面板中的数据。采用两因素方差分析分析(a、b和c)面板中的数据。采用Tukey的多重比较检验进行事后检验。*p <0.05,**p <0.01。
图5. Nampt沉默引发IL-1β处理的SUI成纤维细胞自噬。(a)使用MDC法评估自噬体数量。(b)使用Western blot分析评估LC3 II/I比例和Beclin-1的表达。(c)使用免疫荧光测定评估LC3的荧光强度。独立的细胞实验重复3次。测量数据以平均值±标准偏差呈现。单因素方差分析用于分析(b和c)面板中的数据。采用Tukey的多重比较检验进行事后检验。**p <0.01。
图6. Nampt沉默通过诱导自噬抑制了IL-1β诱导的SUI成纤维细胞ECM降解。使用3-MA处理LV-sh-Nampt组中的成纤维细胞,PBS处理作为对照。(a和b)使用RT-qPCR(a)和Western blot分析(b)测试COL1A、ACAN、TIMP-1、MMP-2和MMP-9的水平。(c)使用免疫荧光测定评估COL1A和ACAN的荧光强度。独立的细胞实验重复3次。测量数据以平均值±标准偏差呈现。采用两因素方差分析分析(a、b和c)面板中的数据。采用Tukey的多重比较检验进行事后检验。*p <0.05,**p <0.01
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