请帮我翻译 Results The current study set out to investigate the role of Nampt in ECM metabolism in SUI fibroblasts Firstly Nampt expression patterns were analyzed in SUI patients and rats In addition we i

结果 本研究旨在探讨Nampt在SUI成纤维细胞中的ECM代谢中的作用。首先，分析了SUI患者和大鼠中Nampt表达模式。此外，我们还研究了Nampt在体外调节成纤维细胞ECM代谢的机制。研究结果表明，Nampt在SUI中过度表达，而Nampt沉默可以抑制SUI成纤维细胞的ECM降解。此外，我们还验证了Nampt沉默可以通过增强自噬抑制SUI成纤维细胞ECM降解。Nampt在SUI患者中过度表达。衰老、阴道分娩和激素水平下降（更年期）被认为是SUI的主要风险因素[25-27]。同时，Nampt参与各种生理过程，如细胞分化、衰老和凋亡[28,29]。因此，为了阐明Nampt在SUI中的作用，我们收集了SUI患者和非SUI患者的前阴道壁组织，检查了组织中Nampt表达模式。RT-qPCR和Western blot分析结果表明，与非SUI患者相比，SUI患者组织中Nampt高度表达（p <0.01，图1a-b）。此外，免疫荧光结果表明，Nampt的荧光信号在SUI患者中相对于非SUI患者过度表达（p <0.01，图1c）。总体而言，这些发现表明Nampt在SUI患者中高度表达。Nampt在SUI大鼠模型中过度表达。采用阴道扩张法（VD）建立了SUI大鼠模型，并通过ALPP和MBV检测进行了确认[18]。发现VD治疗显著降低了大鼠的ALPP和MBV（p <0.01，图2a-b），这表明SUI大鼠模型构建成功。进一步通过RT-qPCR和Western blot分析检查了获得的大鼠前阴道壁组织中的Nampt表达模式，结果表明VD治疗导致组织中Nampt的上调（p <0.01，图2c-d），免疫荧光结果表明VD治疗导致小鼠组织中Nampt荧光信号增强（p <0.01，图2e）。总之，这些发现表明Nampt在SUI大鼠模型中高度表达。Nampt在IL-1β处理的前阴道壁成纤维细胞中上调表达。成纤维细胞功能障碍被确认为SUI发病和发展的主要原因[21,30]。因此，我们从非SUI患者中分离和培养成纤维细胞。免疫细胞化学分析表明，细胞对于成纤维标志物vimentin呈阳性反应，而对于肌上皮细胞标志物keratin呈阴性反应（图3a）。此外，现有文献表明，Nampt参与IL-1β诱导的基质降解过程[31,32]。因此，我们用不同浓度的IL-1β处理成纤维细胞，发现IL-1β浓度越高，细胞活性下降越明显（p <0.05，图3b）。此外，IL-1β处理导致细胞中Nampt水平浓度依赖性上调（p <0.05，图3c-d）。总之，这些发现表明IL-1β处理上调了成纤维细胞中Nampt的表达，并与浓度相关。此外，选择10 ng / mL的IL-1β剂量进行后续实验。Nampt沉默抑制IL-1β诱导的SUI成纤维细胞ECM降解。越来越多的研究证实，机械损伤引起的ECM重塑可能涉及SUI的发病机制[4,33]，而ECM代谢已知是由成纤维细胞介导的[34]。为了进一步阐明Nampt在ECM降解中的作用，将3个LV包装的Nampt shRNA感染到10 ng / mL IL-1β处理过的成纤维细胞中，以减少细胞中Nampt mRNA水平，其中Nampt shRNA 2＃表现出最显著的干预效果（p <0.01，图4a），因此选择LV包装的Nampt shRNA 2＃（LV-sh-Nampt）进行后续分析。此外，发现感染LV-sh-Nampt导致细胞中Nampt蛋白水平下降（p <0.05，图4b）。此外，检查ECM相关蛋白的表达，发现IL-1β处理导致COL1A、ACAN和TIMP-1的表达水平下降，而MMP-2和MMP-9的表达水平上升，而Nampt沉默则出现相反的趋势（所有p <0.01，图4c-d）。此外，免疫荧光试验的结果表明，IL-1β处理下调了COL1A和ACAN的荧光强度，而Nampt沉默则产生相反的效果（所有p <0.01，图4e）。总之，这些发现表明Nampt沉默抑制了IL-1β诱导的成纤维细胞ECM降解