细胞冻存操作步骤:详细指南
- 准备冻存管、冻存液、胰酶、PBS、离心管。
- 提前消毒操作台。
- 取出细胞,去除废液,用PBS清洗细胞2次。
- 加入1ml胰酶,晃动培养皿使胰酶覆盖细胞,放入恒温培养箱中1min消化。
- 取出培养皿,加入2ml培养液终止消化,轻轻吹打细胞使贴壁细胞脱落。
- 将细胞悬液转移至5ml离心管中,以800rpm离心5min。
- 去除上清,加入1ml细胞冻存液后轻轻吹散细胞,转移至冻存管内。
- 在冻存管上标记细胞名称和冻存时间,放入-80℃冰箱保存。
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