细胞培养及克隆形成观察方法

取生长期细胞，用胰酶消化并吹打成单个细胞，每孔接种1000个细胞，加入培养基，置于恒温箱中培养。
将细胞培养皿置于37℃、5%CO2和饱和湿度的细胞培养箱中培养2-3周，每日更换培养基，定期观察细胞状态。当出现肉眼可见的克隆时，停止培养，用PBS冲洗2次，保留。
使用4%多聚甲醛固定细胞5mL，固定15分钟后去除固定液。
向每个孔中加入1.5 mL 0.2%的晶状体紫染液，进行10-30分钟染色，用PBS冲洗3次，每次5分钟，待干燥后拍摄并保存照片。